Tillämpning av kromogen teknik på bakteriellt endotoxintest

Kromogen teknik är bland de tre teknikerna som också innehåller gel-koagelteknik och turbidimetrisk teknik för att detektera eller kvantifiera endotoxiner från gramnegativa bakterier genom att använda amöbocytlysat extraherat från det blå blodet från hästskokrabba (Limulus polyphemus eller Tachypleus tridentatus).Den kan klassificeras som en endpoint-kromogen analys eller en kinetisk-kromogen analys baserad på den speciella analysprincip som används.

Reaktionsprincipen är att: amebocytlysatet innehåller en kaskad av serinproteasenzymer (proenzymer) som kan aktiveras av bakteriella endotoxiner.Endotoxiner aktiverar proenzymerna för att producera aktiverade enzymer (benämnt koagulas), det senare katalyserar splittringen av det färglösa substratet och frigör en gulfärgad produkt pNA.Frisatt pNA kan mätas fotometriskt vid 405 nm.Och absorbansen är positivt korrelerad med endotoxinkoncentrationen, sedan kunde endotoxinkoncentrationen kvantifieras i enlighet därmed.


Posttid: 2019-09-29